氨基柱是同時(shí)可以用于正相和反相條件的一種色譜柱。但正相溶劑和反相溶劑是不互溶的,這一點(diǎn)不能忽略。對(duì)于新購(gòu)柱子,首先請(qǐng)注意打開(kāi)分析測(cè)試說(shuō)明書,了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與你將要使用的流動(dòng)相極性不同不會(huì)互溶,請(qǐng)先用異丙醇過(guò)渡。過(guò)渡過(guò)程中注意因異丙醇粘度較大,會(huì)導(dǎo)致柱壓很高,適當(dāng)調(diào)低流速。如果流動(dòng)相中還有緩沖鹽類,先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過(guò)渡,避免緩沖鹽的析出。
氨基柱是非常“復(fù)雜”和“脆弱”的色譜柱,這就要求我們必須更加細(xì)心的去維護(hù)。
1、比如每次使用前先接上兩通,確保儀器系統(tǒng)中其他項(xiàng)目殘留的流動(dòng)相已被置換*;
2、比如在用于反相模式時(shí),在開(kāi)始使用前先用含有一定比例水相的不含緩沖鹽的流動(dòng)相過(guò)渡,而不要直接上帶有鹽相,特別是較高鹽相的流動(dòng)相——這是因?yàn)橐话闱闆r下,色譜柱都保存在純乙腈/純正相溶劑(如是正相溶劑,過(guò)渡模式需要更換,這個(gè)找機(jī)會(huì)在講過(guò))中,不過(guò)渡的情況下很可能發(fā)生鹽析而破壞柱子,導(dǎo)致柱子壽命縮短;
3、比如使用中確保不要配錯(cuò)流動(dòng)相,防止溶劑走空等;
4、再比如使用后確保清除*柱子中的緩沖鹽,并保存在純有機(jī)相中(ACN)中;
5、后需要提到的一點(diǎn)是,盡管4中要求沖洗*,但是并不是代表可以一直沖洗一直沖洗,壽命跟流經(jīng)柱子的流動(dòng)相體積也在一定情況下成反比,我們必須找到一個(gè)經(jīng)綜合考慮后相對(duì)較優(yōu)的中間點(diǎn),如果無(wú)法確認(rèn)是否沖洗干凈,我們一般認(rèn)為,10~20個(gè)柱體積基本上就能保證沖洗干凈。柱體積怎么算?小編之前的文章中肯定有提到,對(duì)于內(nèi)徑4.6mm的色譜柱,一個(gè)柱體積簡(jiǎn)易的計(jì)算方式是0.1*L(柱長(zhǎng)cm)。請(qǐng)記住沖洗的時(shí)間,定個(gè)鬧鐘,防止沖洗過(guò)渡而降低柱子的使用壽命。