親水色譜柱屬于Z常用的HILIC色譜柱之一,可以非常迅速并有效地分離糖類、多肽、以及低分子量的極性藥物。尤其在針對低聚糖的分析上具優(yōu)勢,TSKgelAmide-80色譜柱現(xiàn)已成為低聚糖分離的標準。
親水色譜柱在用于分離疏水性化合物與常規(guī)的C18相具有相似的選擇性,所以也可以作為一種通用C18柱使用。是專為親水性和極性化合物具有更強的保留能力和選擇性而設計的。典型的應用是對生物分子、代謝物和藥物降解產(chǎn)物如有機酸、水溶性維生素、低聚糖、氨基酸以及小分子縮氨酸和小分子核苷等進行分離。相呈現(xiàn)穩(wěn)定的基線、高選擇性和長保留時間,甚至在中性pH值條件下和沒有緩沖溶液或反離子添加劑條件下使用。
親水色譜柱的注意事項:
1、柱子的存儲:對水分非常敏感,因此在存儲柱子時應避免潮濕和高溫。
2、樣品的制備:由于親水性固定相與極性樣品有很強的相互作用,因此,樣品中必須去除非極性物質(zhì),例如脂類和疏水物質(zhì)等。
3、流動相的選擇:選擇合適的流動相可以提高柱子的穩(wěn)定性和分離效果。通常使用含有一定濃度的鹽類或有機溶劑混合物作為流動相。
4、pH值的調(diào)節(jié):在某些情況下,調(diào)節(jié)流動相的pH值可以提高柱子的穩(wěn)定性和分離效率。
5、注射量的控制:過多的樣品注射量會降低柱子的壽命和分離效率。
6、清洗柱子:使用正確的清洗方法可以延長柱子使用壽命。
總之,親水色譜柱是一種強大的分離技術(shù),可用于分離多種生物大分子和化合物。通過選擇不同的官能團和調(diào)整操作參數(shù),可以實現(xiàn)對分子的高效分離和純化。在生命科學、化學和藥物研究等領域中,是一種*分離工具。